炔基修饰辣根过氧化物酶,HRP-Alkyne的基本组成与性质
创始人
2025-07-01 12:21:11
0

炔基修饰辣根过氧化物酶(HRP-Alkyne)是通过化学方法将炔基功能团引入辣根过氧化物酶(HRP)分子中的一种标记物,结合了HRP的催化活性和炔基的高反应性,在生物化学研究和分析中具有广泛应用。以下是对其的详细介绍:

一、基本组成与性质

辣根过氧化物酶(HRP):

从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。结构:主要由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉(辅基)结合而成,是一种糖蛋白。性质:具有良好的稳定性和催化活性,分子量大约为44,000道尔顿,含有多个同工酶,每个同工酶由308个氨基酸残基和8个糖链组成。

炔基(Alkyne):

结构:具有三键结构的功能团,常用于化学标记和分子连接。反应性:炔基具有高反应性,可以与多种反应物发生点击化学反应,如与叠氮化合物进行Huisgen 1,3-偶极环加成反应。这种反应具有高效、选择性好和易于操作等优点。

炔基修饰辣根过氧化物酶,HRP-Alkyne

二、制备方法

炔基修饰辣根过氧化物酶通常是通过特定的化学反应实现的。例如,HRP分子中与酶活性无关的糖基可以被过碘酸钠氧化为醛基,再与含有炔基的分子通过Schiff碱反应形成连接。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前可以先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的α-和ε-氨基。

三、应用领域

生物检测技术:

HRP作为标记酶,在酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光检测、免疫印迹和免疫组织化学实验等生物检测技术中具有广泛应用。炔基修饰后的HRP可以进一步拓展其应用范围,提高检测的灵敏度和特异性。例如,通过点击化学反应,HRP-Alkyne可以与含有叠氮基团的抗体或蛋白质进行特异性结合,用于构建高灵敏度的生物传感器。

生物成像技术:

HRP-Alkyne可用于生物成像技术,通过其酶活性催化荧光底物反应,生成荧光信号以进行细胞成像。这种方法具有高分辨率和高灵敏度,能够实时监测生物分子在细胞内的分布和动态变化。

药物传递和靶向治疗:

利用炔基的化学反应性,HRP-Alkyne可以与其他分子结合,用于药物传递和靶向治疗。

构建复杂的生物分子:

HRP-Alkyne可以与其他具有功能团的分子通过点击化学反应结合,用于构建复杂的生物分子。这种方法在生物材料科学和合成生物学领域具有潜在的应用价值。

四、优势与特点

高灵敏度和特异性:炔基修饰后的HRP可以通过点击化学反应与含有叠氮基团的分子进行特异性结合,提高了生物检测的灵敏度和特异性。多功能性:HRP-Alkyne可以与多种生物分子结合,用于构建不同类型的生物传感器和成像探针。稳定性好:炔基修饰通常不会显著影响HRP的催化活性和稳定性,使得HRP-Alkyne在多种实验条件下都能保持良好的性能。

五、储存与使用注意事项

储存条件:HRP-Alkyne应储存在适当的条件下,避免高温、高湿度和光照等不利因素对其稳定性的影响。通常建议储存在-20℃的低温环境中。使用限制:HRP-Alkyne仅用于科研目的,不能用于人体实验或临床诊断。在使用过程中,应严格遵守安全操作规程,避免接触皮肤和眼睛。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体!

同系列:

Glucose-Biotin生物素标记葡萄糖

Palmitic acid-Biotin棕榈酸标记生物素

Wogonin-Biotin汉黄芩素标记生物素

Streptavidin-Biotin链霉亲和素标记生物素

lndole-Biotin叼噪标记生物素

Phenylboronic acid-Biotin苯硼酸标记生物素

DBCO-Biotin二苯基环辛炔标记生物素

Biotin-Rapamycin生物素标记雷帕霉素

Biotin-Celastrol生物素标记雷公藤红素

Biotin-PEG3-SS-DBCO

Biotin-mannose,生物素修饰甘露糖

Biotin-Citric acid,生物素修饰柠檬酸

Biotin-LPS 生物素-脂多糖

相关内容

热门资讯

原创 苹... 有不少朋友疑惑苹果iPhone 16 Pro和16 Pro Max有什么区别?该选择哪一款更好?各自...
第五轮学科评估对比:西安交大突... 在之前的文章中,我们已经提及西安交通大学第五轮学科评估的表现可圈可点,新晋的3个A+学科:机械工程、...
2024年OPPO手机全攻略:... 手机已不仅仅是通讯工具,它更是我们记录生活、享受娱乐、提升工作效率的重要伙伴。随着科技的飞速发展,O...
原创 2... 从去年华为用上了麒麟芯片开始,华为的市场份额就蹭蹭的往上涨,当时抢购的人特别多,一时间还买不到现货,...
vivo钱包遭用户投诉贷款利率... 文:WEMONEY研究室 随着移动互联网时代到来,智能手机已经成为了生活的必需品。目前,很多手机如...
2025年值得入手的2款智能手... 在科技飞速发展的今天,智能手表已成为我们生活中不可或缺的伙伴。无论是健康监测、信息提醒,还是时尚搭配...
虚拟资料变现还值得做吗?闲鱼卖... 大家好,今天给大家带来的是咸鱼虚拟资料类项目分享,这个项目其实出来很久了,有些人觉得虚拟资料没水准,...
解决FaceTime无法使用的... FaceTime是苹果公司推出的一款视频通话应用,广泛应用于iPhone、iPad和Mac等设备上。...
gta5加载慢怎么办 gta5... 许多玩家在GTA5游戏过程中都会遇到加载速度慢的问题,那么gta5加载慢怎么办?今天加游加速器就来告...
steam官网无法访问?这个办... 对于广大游戏爱好者而言,Steam平台无疑是获取最新游戏资讯、购买游戏、与全球玩家互动的重要阵地。然...